一分快三APP平台

  • <tr id='i38TZs'><strong id='i38TZs'></strong><small id='i38TZs'></small><button id='i38TZs'></button><li id='i38TZs'><noscript id='i38TZs'><big id='i38TZs'></big><dt id='i38TZs'></dt></noscript></li></tr><ol id='i38TZs'><option id='i38TZs'><table id='i38TZs'><blockquote id='i38TZs'><tbody id='i38TZs'></tbody></blockquote></table></option></ol><u id='i38TZs'></u><kbd id='i38TZs'><kbd id='i38TZs'></kbd></kbd>

    <code id='i38TZs'><strong id='i38TZs'></strong></code>

    <fieldset id='i38TZs'></fieldset>
          <span id='i38TZs'></span>

              <ins id='i38TZs'></ins>
              <acronym id='i38TZs'><em id='i38TZs'></em><td id='i38TZs'><div id='i38TZs'></div></td></acronym><address id='i38TZs'><big id='i38TZs'><big id='i38TZs'></big><legend id='i38TZs'></legend></big></address>

              <i id='i38TZs'><div id='i38TZs'><ins id='i38TZs'></ins></div></i>
              <i id='i38TZs'></i>
            1. <dl id='i38TZs'></dl>
              1. <blockquote id='i38TZs'><q id='i38TZs'><noscript id='i38TZs'></noscript><dt id='i38TZs'></dt></q></blockquote><noframes id='i38TZs'><i id='i38TZs'></i>

                载体蛋白偶联

                时间:2022-05-01浏览次数:1651

                -载体蛋白衔接多用于制备抗毒素类抗体,单独的单个通常通常小小的不足以激起充分︽的免疫反应≡,而带有很多抗原表位的载体蛋白有利于刺激辅助性T细胞,进一步诱导B细胞免疫反应。合生生物偶联蛋白主要如下几种:

                KLHKeyhole Limpet Hemocyanin),即血蓝●蛋白,由于KLHBSA有更高的免疫原性,因此是最常被替换的载体蛋白。

                 

                BSA(牛血清白蛋白),即牛血清白蛋白,属于最稳@定的和可溶的白蛋白。BSA的不利之处在于在很多实验中,它被当作封闭剂使用,如果多肽-BSA偶联物的抗血清用于这样的检测♀分析中,通常会出现假阳性,因为这些血清含有抗BSA的抗体。

                 

                OVAOvalbumin),即鸡卵白蛋白,它可作为第二载体蛋白去验证♀抗体是否仅针对靶向而并非载体蛋白(如BSA)。


                对在动物体内产生免疫反应而言,大多数多肽的分∮子量都太小。将多肽与载体蛋白如KLH等偶联之后,不仅能增加抗原的大小,也能增强》免疫性。我们可以提供与KLH,BSA和OVA蛋白的偶联。大多№数客户选择与KLH交联,因为KLH的免疫性更好,而且BSA在很多实验中作为Blocking试剂,由于动物体内既会产生对多肽的抗体也╱会产生对载体蛋白的抗体,这样会出现假阳性。

                KLH,BSA,OVA是分子量十分巨大的蛋白,有几百万Da,所以在其分子表面有大量的』活性基团,最常用于偶联的是伯胺基团。小的多肽通常也带有不同基团可以用于偶联,常用的有伯胺基团,羧基巯基
                多肽与KLH的偶联就是利用这些基团,再通过交联∏剂(crosslinker),将多肽上的巯基/羧基/伯胺与KLH上的伯胺相连,从而形成
                共价偶联,制备成完全抗原,用于免疫动物获得抗体。所以偶联的〓伯胺应该是来自于赖氨酸侧链和N端,而偶联的羧基则来自于天冬氨酸谷氨酸和C端,巯基则来自于半胱氨酸。至于偶联上去的数量,和〓加入的肽段,交联剂,KLH的摩尔比例有关。通常一分子KLH上可能会偶联上百个肽段。

                 

                偶联方法

                我们用MBS活化载体蛋白▲,这样能将载体蛋白上面的自由-SH与多肽末端的Cys的侧链-SH连接起来,这种方法▂直接,特异性高,而且稳定,通常选择对免疫不重要的↑一端进行交联。 EDC活化载体上的-COOH,将载体的-COOH和多肽的-NH2连接起来也是一种可行的方法。但我们只建议在多肽〒序列中有多个Cys时采用该方法。如果肽链中含有多个-COOH或-NH2基因,不建议ξ 使用该方法,因为会造成卐多重点交联的情况,使多肽结构受影响。常用载体蛋白除KLH外,还有BSA,OVA等,KLH的优势是它不干扰◆◆ELISA或Western Blot等实验。


                载体蛋白偶联.png


                KLH偶联溶液混浊的原因

                KLH是一个很大的并且聚合的︼蛋白。因为它的结构和大小,它在水中的溶解度是很有限⌒的,因此是乳状,这并不影响它的免疫性,这种混浊的溶液可以√直接免疫动物。



                电话:400-108-1628

                销售邮箱:sales@hnmrpo.com

                销售电话/微信:17682162835,13865214774,15212772361

                技术支持/微信:17682162835

                销售 QQ:475590620

                下一篇:MAPs分支肽